Conseils relatifs aux films d'autoradiographie
Stockage et manipulation des films d'autoradiographie
Le stockage et la manipulation des films sont extrêmement importants afin d'obtenir des résultats de haute qualité et reproductibles. Stockez les paquets de films non ouverts dans un endroit suffisamment protégé des radiations pénétrantes, à des températures comprises entre 10 et 20 °C et à une humidité relative comprise entre 30 et 50 %.
Rangez-les en position verticale. Ne les empilez pas : les contraintes engendrées par le poids ou la pression sur les films peuvent provoquer des plis, les gondoler ou les faire frotter les uns contre les autres.
Évitez de sortir les films trop rapidement de leur boîte ou de les manier d'une manière susceptible de provoquer une décharge d'électricité statique. Après l’exposition, retirez soigneusement le film de l’échantillon afin d'éviter tout artefact statique susceptible d’endommager les autoradiographies exposées.
Procédures d’éclairage inactinique correct
Pour obtenir des autoradiographies de haute qualité, veillez à ce que l’embrasure de porte, les murs, le plafond et les fenêtres ne laissent pas filtrer la lumière dans votre chambre noire. Vous devez vous assurer que les conditions d'éclairage inactinique sont correctes.
Ce type d’éclairage a pour but de fournir un éclairage suffisant dans la chambre noire tout en protégeant le film d’une exposition indésirable. L’éclairage inactinique de la chambre noire dépend des conditions suivantes :
« Inactinique » est un terme relatif. La plupart des matériaux sensibles deviendront troubles si vous les exposez à un éclairage inactinique pendant une durée prolongée. Vous devez donc toujours minimiser l’exposition des films autoradiographiques et pour microscopes électroniques aux éclairages inactiniques.
Les films d'autoradiographie doivent être manipulés dans des conditions de sécurité adéquates à l'aide d'une lampe inactinique équipée d'un filtre inactinique GBX-2 et d'une ampoule dépolie de 15 W (d'autres lampes inactiniques peuvent entraîner l'augmentation du voile de fond et/ou une exposition indésirable des images). La lampe inactinique doit toujours être placée à au moins 120 cm du film. Réduisez au minimum la durée d'exposition du film aux conditions d’éclairage inactinique.
Procédures d'exposition recommandées pour l'autoradiographie
Vous obtiendrez la meilleure résolution d’image en exposant directement l'échantillon à l’émulsion. L’usage d’un écran renforçateur ou de la fluorographie augmente la sensibilité, mais diminue la résolution. Les écrans renforçateurs classiques ne sont pas efficaces avec le 3H, le 14C ou le 35S, car les émissions de ces isotopes ne sont pas suffisantes pour pénétrer le film et entrer en contact avec l'écran renforçateur. Le BioMax TranScreen LE est le seul écran renforçateur disponible pour une utilisation avec des radio-isotopes de moyenne et faible énergie tels que le 3H, le 14C ou le 35S.
Développement automatisé
Tous les films BioMax pour l'autoradiographie peuvent être traités dans des équipements de développement automatique à transport par rouleaux avec le développeur/régénérateur RP X-Omat et le fixateur/régénérateur RP X-Omat LO.
Développement manuel
Le développement manuel des autoradiographies peut s’effectuer de deux manières. La différence réside principalement dans le volume de produits chimiques utilisés et la façon de transférer les films d’une solution à l’autre. Le produit chimique recommandé pour le développement est le même pour les deux méthodes.
Le développement en cuve profonde nécessite habituellement des cuves d’environ 19 litres de révélateur et de fixateur immergées dans un bain-marie. Le bain-marie régule la température du révélateur et du fixateur. Le film est transféré manuellement d’une cuve à l’autre, à l'aide de cadres porte-film métalliques.
Le développement en cuves comprend un minimum de trois cuves dont les dimensions dépassent la taille du film d’au moins deux centimètres et une quantité suffisante d’eau courante pour le lavage. Le film est transféré d’une cuve à l’autre manuellement, au moyen de pinces photo.
Pour obtenir des autoradiographies de haute qualité, il est essentiel de préserver la fraîcheur des produits chimiques utilisés pour le développement. Les vieux révélateurs et fixateurs auront un effet défavorable sur la qualité de l'image du film traité, même s’ils ne sont pas fréquemment utilisés. Nous vous recommandons de changer le révélateur et le fixateur tous les mois pour garantir des conditions de développement optimales.
Étape I : Révélateur
Nous recommandons l'utilisation du révélateur et régénérateur GBX pour le développement des films autoradiographiques Carestream. Les films, fixés sur les cadres porte-film métalliques, doivent êtres placés dans le réservoir de révélateur pendant 5 minutes à une température de 20 °C. Évitez d’agiter le film dans le révélateur. Le taux de réapprovisionnement est de 60 ml de révélateur et de régénérateur GBX pour chaque film de 35 x 43 cm traité. Le révélateur et régénérateur GBX doit être entièrement remplacé tous les mois par du révélateur frais afin de garantir une exposition du film autoradiographique Carestream de haute qualité.
Étape II : Rinçage
Enlevez le film du révélateur et placez-le sous l’eau courante. Rincez en agitant modérément et sans arrêt pendant 30 secondes. La température de rinçage recommandée est de 16 à 24 °C. Vous pouvez également utiliser le bain d’arrêt indicateur GBX pour le rinçage du film.
Étape III : Fixation
Nous recommandons l'utilisation du révélateur et régénérateur GBX pour la fixation des films autoradiographiques. Sortez le film du produit de rinçage et placez-le dans la cuve de fixateur pendant 5 à 10 minutes. La température recommandée pour le fixateur est de 16 à 24 °C. Une agitation modérée du film dans le fixateur est recommandée pendant le bain.
Le taux de réapprovisionnement est de 75 ml de fixateur et régénérateur pour chaque plan-film de 35 x 43 cm développé. Le fixateur et régénérateur GBX doit être entièrement remplacé tous les mois par du fixateur frais afin de garantir une exposition du film autoradiographique Carestream de haute qualité.
Étape IV : Rinçage
Sortez le film du fixateur et rincez-le à l'eau courante pendant 5 à 10 minutes. Le rinçage à l'eau courante doit être effectué à une température de 16 à 24 °C avec un taux de renouvellement de 8 volumes par heure.
Étape V : Séchage
Sortez le plan-film de l’eau de rinçage et accrochez-le par un coin à l’aide d’une pince dans un endroit à l’abri de la poussière, à température ambiante jusqu’à séchage complet.